紐約自然博物館重新開張，小保安賴瑞·戴利（本·斯蒂勒 Ben Stiller 飾）帶領泰迪·羅斯福（羅賓·威廉姆斯 Robin Williams 飾）策劃了精彩的開幕演出。誰知演出剛剛沒多久，泰迪、猴子他們便陷入混亂，所有博物館的伙伴們大鬧會場，賴瑞為此焦頭爛額。事后他 發現，復活黃金碑正被綠色的物質腐蝕，而這種情況似乎導致了藏品們的瘋狂。賴瑞查找資料，斷定黃金碑背后隱藏著不為人知的秘密。為了阻止混亂情況的蔓延，他決定前往大英博物館求助法老王阿卡曼拉的父親，當然那堆搞怪的藏品也都尾隨而至。途中他們遇見了圓桌騎士蘭斯洛特爵士，還和屋大維等伙伴走散。
　　久違的奇妙冒險，就在夜幕下的大英博物館的展開……

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